辅助孵出的指征包括以下几个：
1、透明带过厚，在胚胎透明带缺乏变薄的过程中（例如缺乏足够的蛋白酶），早期胚胎容易困在透明带内而无法着床，某些胚胎，特别是形态较差的胚胎，其透明带缺乏变薄的过程可能是其中植失败的原因之一，一般透明带厚度〉15um时，辅助孵出可促进胚胎的自然孵出和着床，但当透明带厚度<13um时,对胚胎行辅助孵出可能对胚胎无益.
2、透明带/早期胚胎形态异常,椭圆形卵和早期胚胎在临床上并不少见,但其桑葚胚的紧密连接过程和继续的发育可能受影响,在体外囊胚的孵出率也比正常的圆形卵低,畸形卵通常有部份或全部透明带为双层结构,这种双层结构在卵泡内卵子发育的早期形成,辅助孵出可能可以帮助加强细胞与细胞之间的联系,紧密过程和孵出.
3、透明带颜色异常,在体外培养过程中,有时可见透明带很黑,呈棕黑色或黄黑色,一般认为这是由于取卵时卵子过熟引起的,随着培养时间的延长,卵子逐渐变黑和退化,辅助孵出可能对其有帮助.
4、胚胎发育速度/形态异常,发育缓慢的早期胚胎在第三天(受精后68~72小时)仍不到6细胞.与对照组相比,对发育缓慢的胚胎行辅助孵出后的种植率明显提高,推测可能与透明带的小孔促进营养物质的运输以及胚胎通过小孔孵出两方面都有关,胚胎形态异常,包括卵裂球大小不规则,胞浆颗料精,胞浆空泡和包涵体以及其他在光学显微镜下观察到的异常均可作为辅助孵出的指征.
5、既往病史,在多次重复IVF治疗的病人中,大部份的胚胎质量在不同的治疗周期中类似,因此可根据以往的资料大体推测胚胎的质量.如果既往胚胎质量差,可考虑进行辅助孵出,不管病人的年龄,2次以上的IVF失败均是辅助孵出的指征.
6、年龄, 年龄与种植率和妊娠结局的关系已明确,当妇女年龄超过40岁时,胚胎的种植率显著降低,其原因可能与透明带变薄的能力降低以及内分泌系统的改变有关,因此,可根据年龄一项决定是否行辅助孵出
7、基础FSH水平 ,基础FSH水平升高反应了卵巢储备不足,可能对卵子和透明带在卵泡内发育一定的影响,有研究表明对基础FSH水平升高的病人行辅助孵出可使种植率提高一倍.
8、胞浆碎片.
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